原代細胞分離培養(yǎng)都有哪幾種方法？

　　研究中常用的細胞系/株系是現(xiàn)成的，我們只需要進行細胞傳代和種子保存。然而，這些細胞系往往因長期體外培養(yǎng)而失去原有的生物學特性，對藥物治療的反應差距越來越大。因此，越來越多的人選擇原代細胞。來源于胚胎、組織、器官和外周血，經(jīng)特殊分離方法制備的原代培養(yǎng)細胞稱為原代細胞。原代細胞培養(yǎng)，也稱為原代培養(yǎng)，是從供體獲得的組織細胞在體外的培養(yǎng)。

　　

　　原代細胞是接近和最能反映體內生長特性的細胞，適用于藥敏試驗、細胞分化等實驗研究。原代細胞分離培養(yǎng)都有哪幾種方法？

　　

　　1、組織培養(yǎng)法

　　

　　組織培養(yǎng)是一種常見、簡單且成功的原代細胞分離培養(yǎng)方法?；痉椒ㄊ菍⑶邢碌男〗M織塊接種到培養(yǎng)瓶（或培養(yǎng)皿）中。瓶壁可預先涂上一層薄薄的膠原蛋白，以利于組織團粘附在瓶壁上，使周圍的細胞沿瓶壁向外生長。

　　

　　2、消化培養(yǎng)法

　　

　　組織消化法是將組織切成小塊（或糊狀），通過酶的生化作用和非酶的化學作用，使細胞間的橋接結構進一步松散，使團塊由團塊變成絮狀。此時，采用機械法用稻草吹散細胞團塊，或在搖瓶中進行電磁攪拌或搖動，使細胞團塊充分分散，制成少量細胞團塊和大量單細胞細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞易貼壁生長。

　　

　　3、懸浮細胞培養(yǎng)

　　

　　懸浮生長的細胞，如胸水和腹水中的白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、癌細胞和免疫細胞，不需要被消化。可以低速離心分離直接培養(yǎng)，也可以用淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　　

　　4、器官培養(yǎng)

　　

　　器官培養(yǎng)是指從供體獲得的器官或組織塊在體外特定環(huán)境條件下不進行組織分離的培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可以保持器官和組織的相對完整性，可用于觀察細胞之間的連接、排列和相互作用，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)。