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胎牛血清FBS用作真核細(xì)胞體外細(xì)胞培養(yǎng)的生長補(bǔ)充劑。動(dòng)物血清(牛血清和其它動(dòng)物血清)都用于細(xì)胞培養(yǎng),其中使用廣泛的是胎牛血清(FBS)。FBS含有生長因子和極低水平的抗體,因此在許多不同的細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用中具有多功能性。在FBS中發(fā)現(xiàn)了1000多種成分,包括蛋白質(zhì),電解質(zhì),脂質(zhì),碳水化合物,激素,酶和其他不確定的成分,這些成分在許多培養(yǎng)條件下對于支持細(xì)胞生長都是必需的。與其它類型血清相比,胚胎期動(dòng)物血清含有更多的生長因子,及較少的gamma球蛋白含量。此外,跟新生動(dòng)物血清和成體動(dòng)...
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細(xì)胞是組成機(jī)體結(jié)構(gòu)和功能的基本單位,所以細(xì)胞的功能是生理學(xué)中一項(xiàng)重要的研究內(nèi)容。細(xì)胞膜也稱質(zhì)膜,主要由脂質(zhì)和蛋白質(zhì)組成,還有少量糖類物質(zhì)。一般而言,功能活躍的細(xì)胞,膜蛋白含量較高;而在功能簡單的細(xì)胞,則膜蛋白含量較低。目前以液態(tài)鑲嵌模型學(xué)說為主。細(xì)胞功能研究都研究些什么?細(xì)胞的基本功能:1、細(xì)胞膜的物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)功能:2、細(xì)胞的電活動(dòng):包括兩大類:靜息電位和動(dòng)作電位。(1)靜息電位:安靜時(shí)細(xì)胞膜兩側(cè)處于外正內(nèi)負(fù)的狀態(tài)稱為靜息電位,又稱為極化。產(chǎn)生原因:鈉泵的生電效應(yīng)使膜內(nèi)負(fù)值增大,...
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細(xì)胞凋亡(apoptosis)是一種在多細(xì)胞生物體中發(fā)生的程序性細(xì)胞死亡形式,屬于細(xì)胞的正常生理過程,在生物體進(jìn)化、內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定以及發(fā)育過程中起著重要作用,具有重要生物學(xué)意義及復(fù)雜的分子生物學(xué)機(jī)制。在生物學(xué)研究過程中常常需要檢測細(xì)胞凋亡情況。目前至少有十?dāng)?shù)種檢測細(xì)胞凋亡的方法,大致可分為基于細(xì)胞形態(tài)、生物學(xué)功能和生化標(biāo)記三大類。每一方法都有其優(yōu)缺點(diǎn),需要根據(jù)實(shí)際情況選擇適合的細(xì)胞凋亡檢測方法。1、電子顯微鏡檢測方法在透射電鏡下,凋亡細(xì)胞體積變小。凋亡Ⅰ期(pro-apopto...
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充質(zhì)干細(xì)胞是組織的建造者和功能維持者:在組織形態(tài)發(fā)生中負(fù)責(zé)搭建腳手架,分化出骨骼、軟骨、脂肪、纖維等結(jié)締組織,構(gòu)成器官發(fā)育框架結(jié)構(gòu);而且,間充質(zhì)干細(xì)胞可以分泌數(shù)十種因子,為各種分化細(xì)胞提供所需營養(yǎng)。其基本特性包括:1、強(qiáng)大的增殖能力和多向分化潛能:在適宜的體內(nèi)或體外環(huán)境下分化為成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、肌細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、肝細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、基質(zhì)細(xì)胞等多種細(xì)胞的能力。2、免疫調(diào)節(jié)功能:通過細(xì)胞間的相互作用及產(chǎn)生細(xì)胞因子干擾樹突狀細(xì)胞功能并抑制T細(xì)胞的增殖及其免疫反應(yīng),從而發(fā)揮...
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耐藥細(xì)胞株一般采用體外低濃度遞增梯度結(jié)合大劑量間歇沖擊的方法,誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞對特定藥物產(chǎn)生耐藥性,從而建立相應(yīng)的耐藥細(xì)胞系。細(xì)胞株的服務(wù)內(nèi)容包括哪些?1、在體外,低濃度梯度遞增結(jié)合大劑量間歇沖擊誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生耐藥性。2、藥物對親代細(xì)胞和耐藥細(xì)胞的IC50用2。MTT法,計(jì)算耐藥指數(shù)。目前已知的體外建立耐藥細(xì)胞株的方法有幾種:高劑量藥物沖擊法、提高藥物濃度法、提高藥物濃度與高劑量藥物沖擊相結(jié)合法、轉(zhuǎn)基因藥物篩選法。其中,常用增加藥物濃度法和大劑量藥物沖擊法建立腫瘤細(xì)胞化療耐藥模型。...
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細(xì)胞株通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物稱為細(xì)胞株,是用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法,由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群。細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個(gè)培養(yǎng)期間始終存在。特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個(gè)培養(yǎng)期間始終存在。對于人類腫瘤細(xì)胞,在體外培養(yǎng)半年以上,生長穩(wěn)定,并連續(xù)傳代的即可稱為連續(xù)性株或系。細(xì)胞株的建立實(shí)驗(yàn)是通過細(xì)胞與低劑量的藥物長期接觸,引起細(xì)胞本身生物化學(xué)過程的改變,細(xì)胞膜上出現(xiàn)Pgp(或P-170)糖蛋白,使細(xì)胞逐漸對藥物耐受。工具...
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標(biāo)記細(xì)胞株是細(xì)胞系中特定標(biāo)簽(Luc、GFP、RFP等)的穩(wěn)定轉(zhuǎn)移,該細(xì)胞系可用作示蹤細(xì)胞,為細(xì)胞成像和體內(nèi)成像提供了很大的便利。標(biāo)記細(xì)胞株的分離和培養(yǎng):1、在無菌條件下,取出1-3DSD大鼠的心房組織,然后用PBS清洗組織塊兩次,然后將組織切成1mm3左右;2、在組織塊中加入4ml酶消化液(0.1%胰蛋白酶和0.1%Ⅰ型膠原酶),懸停10s,37℃消化10min,然后用滴定管吹成單細(xì)胞懸液,自然沉淀收集取上清,用10%fbs培養(yǎng)基消化終止后置于4℃;3、剩余組織加入3~4m...
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凋亡或者說程序性細(xì)胞死亡,是細(xì)胞內(nèi)建的防御機(jī)制之一,在生物的正常發(fā)育及疾病抵御中起到重要的作用。凋亡過程與通路的異常,會(huì)導(dǎo)致多種疾病,包括腫瘤。目前至少有十?dāng)?shù)種檢測細(xì)胞凋亡的方法,從大框架上講,可以劃分為基于細(xì)胞形態(tài)、生物學(xué)功能和生化標(biāo)記三大類。那么細(xì)胞凋亡檢測基于形態(tài)學(xué)的方法是怎么操作的呢?1、電子顯微鏡檢查“凋亡”是一個(gè)細(xì)胞形態(tài)學(xué)概念。因此,鑒定凋亡的金指標(biāo),往往是基于形態(tài)學(xué)的。凋亡和另外一種主要的細(xì)胞死亡類型“壞死”有著顯著的亞細(xì)胞形態(tài)差異。簡而言之,在透射電鏡下,凋亡...
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